研究結(jié)合動(dòng)力學(xué)與片段篩選分析的高性能平臺(tái)

Pioneer與 Pioneer FE系統(tǒng)應(yīng)用獨(dú)特的單次進(jìn)樣模式， 僅需幾分鐘便可提供高質(zhì)量的動(dòng)力學(xué) ( ka， Kd）和親和力 ( KD ) 數(shù)據(jù)。系統(tǒng)應(yīng)用表面等離子共振 ( SPR) 技術(shù)， 可對小分子片段到生物制劑等各種生物分子的相互作用進(jìn)行超高靈敏度的 快速 表征。Pioneer系統(tǒng)在化合物初級篩選階段即可直接快速獲取親和力數(shù)據(jù)(KD)， 顯著降低篩選時(shí)間和成本，迅速找到理想的先導(dǎo)化合物候選物。

Pioneer平臺(tái)助力決策先行

應(yīng)用OneStep® 梯度進(jìn)樣模式 ， 在樣品初級篩選階段即可獲得可靠的 親和力 (KD) 和動(dòng)力學(xué)(Ka， Kd)數(shù)據(jù)

在24小時(shí)內(nèi)， 通過單次實(shí)驗(yàn)完成 768個(gè)小分子片段的動(dòng)力學(xué)篩選 。

在29 個(gè)小時(shí)內(nèi)， 獲取64 個(gè)樣品完整詳盡的高質(zhì)量動(dòng)力學(xué)表征數(shù)據(jù) 。

極低的基線噪音與基線漂移確保系統(tǒng)高靈敏度表現(xiàn) ， 輕松應(yīng)對超高親和力樣品。

依據(jù)Scrubber 和Clamp 架構(gòu)設(shè)計(jì)的數(shù)據(jù)分析軟件 ， 結(jié)果可靠， 廣獲業(yè)界認(rèn)可。

全自動(dòng)化設(shè)計(jì)， 實(shí)現(xiàn)72 小時(shí)無人值守運(yùn)行

片段篩選的新金標(biāo)準(zhǔn)

片段篩選面臨諸多技術(shù)挑戰(zhàn)

樣品數(shù)量巨大

分析物分子量較低 (<300 Da)

結(jié)合親和力低(KD : 10 μ M 至 10 mM)

受溶解度限制 ， 無法用高濃度樣品 (>KD )測試結(jié)合

結(jié)合解離曲線為快上快下模式且信號很低，無法做出準(zhǔn)確判定

Pioneer FE系統(tǒng)的OneStep進(jìn)樣方法將有效改 變基千片段的藥物發(fā)現(xiàn)

(fragment-based drug discovery， FBDD) 檢測模式：

提升通量， 24小時(shí)完成 768個(gè)樣品檢測

在初級篩選過程中直接得到動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)，省去次級篩選

連續(xù)濃度梯度的進(jìn)樣方式可獲得更多數(shù)據(jù)內(nèi)容

樣品單次進(jìn)樣模式可大幅減少樣品用量及制備時(shí)間

快捷的數(shù)據(jù)分析

對由SPR獲得的 片段篩選數(shù)據(jù)進(jìn)行分析通常非常繁瑣 ， 分析單塊微孔板的篩選數(shù)據(jù)往往需就要好幾天。Qdat分析軟件使用統(tǒng)一的方法從候選物庫中選擇活性物，并允許對于不同日期或儀器中采集的篩選數(shù)據(jù)進(jìn)行歸一化處理， 因此可以比較整個(gè)篩選活動(dòng)。這種集成導(dǎo)致后處理時(shí)間的顯著減少。該軟件提供多種模型用于擬合相互作用數(shù)據(jù) ， 包括動(dòng)力學(xué)， 質(zhì)量遷移校正和多位點(diǎn)結(jié)合模型。初級篩選的數(shù)據(jù)可直接用千親和力KD分析， 而不必運(yùn)行耗時(shí)費(fèi)力的次級篩選 。

片段篩選中的競爭檢測

競爭檢測在藥物發(fā)現(xiàn)中非常有用。可通過對照分子和陽性片段的競爭， 直接找到目標(biāo)活性位點(diǎn)的結(jié)合物。與OneStep模式一樣，NeXtStep進(jìn)樣模式能夠在單次進(jìn)樣中進(jìn)行完整的動(dòng)力學(xué)分析。當(dāng)競爭分子存在的情況下，不同位點(diǎn)特異性競爭能夠被清楚地進(jìn)行不同結(jié)合能力的檢測 。

蛋白－小分子相互作用

蛋白質(zhì)和小分子之間的相互作用已成 為學(xué)術(shù)研究 和藥物研發(fā)的核心。Pioneer 系統(tǒng)將優(yōu)異的靈敏度與新穎的 表面化學(xué)**結(jié)合，完全滿足對低至70Da的小分子進(jìn)行動(dòng) 力學(xué)測定。該級別的定量分析數(shù)據(jù)有助千研究人員獲取更多新藥候選物的相關(guān)信息。

Pioneer系統(tǒng)參數(shù)

折光率范圍1.33- 1.40

短期基線噪音 < 0. 1RU

長期基線漂移 < 0.3RU /min

檢測分子量下限 < 70 Da

檢測范圍 ka 10 ² -10⁸ M·' s·'

kd10 ^-6 - 0.1 s^-1

K D 1 0^-3 - 10 ^-12 M

樣品載量 2 樣品規(guī)格 96孔板（普通／深孔/PCR)， 384 孔板

樣品溫控 4 至 40攝氏度 (小于室溫15攝氏度 )

樣品進(jìn)樣 全自動(dòng)

通道數(shù) 3

流路 1， 1- 2， 1- 2- 3， 3， 3- 2， 3-2-1

流路體積 < 90 nl

通道死體積 < 20 nl

實(shí)時(shí)扣減參比曲線 是

進(jìn)樣體積 2- 700 μL

進(jìn)樣反應(yīng)時(shí)間 < 0.75 second @ 25 μL/min

同時(shí)進(jìn)樣 可以，可支持兩個(gè)樣品同時(shí)進(jìn)樣

梯度進(jìn)樣 是

流速 0.1- 150 μL/ min

緩沖液在線脫氣 是

系統(tǒng)溫控 4 至 40°C (小于室溫15°)

數(shù)據(jù)采集頻率 1-20Hz

自動(dòng)化能力 >72 小時(shí)無人值守運(yùn)行

傳感器種類

基于氨基偶聯(lián) COOHl ， COOH2， COOH5 ， COOHV

基于Avidin-Biotin偶聯(lián) AvCap and BioCap

親和捕獲組氨酸標(biāo)簽蛋白 HisCap

用于囊泡捕獲 VesCap