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B族維生素是一類水溶性小分子化合物，該類化合物不具備相似的結構，普遍以輔酶的形式廣泛參與到各種生理過程中 。目前已知的B族維生素主要為：維生素B1（硫銨）、維生素B2（核黃素）、維生素B3（煙酸）、維生素B5（泛酸）、維生素B6（吡哆醇）、維生素B7（生物素）、維生素B9（葉酸）、維生素B12（鈷胺素），今天來了解下維生素B1.

維生素B1或者硫胺素是一種提供糖類代謝需要的元素，幫助身體獲得能量的基本無機物。它能夠幫助保持中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常運行。缺乏維生素B1可能導致體重減少、微弱或者不規(guī)律的心跳速率、情緒失調和韋尼克腦病。

由于維生素B1有小粒徑和低分子量，是確定動態(tài)光散射（DLS）濃度限制的理想樣品，本文通過DLS測試維生素B1粒度。

動態(tài)光散射（DLS）是一種用來表征在懸浮液或溶液中顆粒和分子粒度的物理技術。此技術基于隨時間發(fā)生的散射光信號強度變化。顆粒產(chǎn)生散射光，顆粒的隨機運動產(chǎn)生散射光的波動。通過測試散射光，可以得到顆粒的運動速度；通過顆粒的運動速度，可以用斯托克斯-愛因斯坦方程計算出顆粒的水動力學粒徑。

做好DLS測試的一個重要因素是使用正確的濃度。顆粒濃度必須足夠高以便產(chǎn)生好的散射強度。另一方面，濃度如果太高可能產(chǎn)生多重散射，得到一個錯誤的結果。

檢測角度也會影響結果。例如，側向散射（90°）適用于弱散射樣品，包括小顆粒和透明樣品；背散射（175°）適用于強散射樣品，包括大顆粒、高濃度或者渾濁樣品。安東帕Litesizer 500的一個獨特功能是它的自動測試角度選擇，允許儀器選擇最佳的測試角度。此選擇基于樣品的連續(xù)透光率測試。此功能對于用戶處理未知或者不熟悉樣品非常有用。

用去離子水制備三種濃度（50,80和100 mg/ml）的維生素B1溶液，然后在測試前用20 nm針孔過濾器（Whatman Anotop 10）過濾。維生素B1的名義粒徑大小是0.6 nm。所有測試在25 ℃下，用安東帕Litesizer 500操作8次以便驗證測試重現(xiàn)性。每個樣品的最佳測試角度由儀器自動選擇（如圖2）。

應用如圖2軟件的自動測試角度選擇功能，三種不同濃度維生素B1的平均水動力學直徑的測試結果如表1所示。系統(tǒng)自動為所有三個測試選擇側向散射（90°）。測試角度選擇基于安東帕Litesizer 500對所有樣品連續(xù)監(jiān)控的透光率檢測。

維生素B1的名義粒徑是0.6 nm，因此100 mg/ml溶液的結果比50和80 mg/ml溶液更加準確。在此情況下，濃度對測試結果有重要影響，即濃度越低偏差越大。

*每次測試重復七次

在這個研究中，DLS測試最合適的濃度可以通過測試小粒徑和小分子量樣品例如維生素B1來確定。

安東帕Litesizer 500的自動測試角度選擇功能消除用戶在測試角度選擇方面，尤其針對未知或者不熟悉樣品角度如何選擇的困擾。