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如何修煉成流式高手 - 樣本檢測

如何修煉成流式高手 - 樣本檢測
貝克曼庫爾特生命科學  2020-10-29  |  閱讀:2090

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新建自動補償實驗

問題來了,為什么調電壓就的重新補償?

熒光補償的目的就是消除熒光溢漏對數據分析的復雜性,保證檢測結果的準確性。從下面公式(以FITC溢漏到PE通道為例)可以看出,熒光溢漏(補償)的大小和平均熒光強度有直接關系,電壓gain值的大小又影響著MFI的大小。故電壓Gain的大小會直接影響熒光補償值的大小。

640 (2).png

Tips:補償調節時要注意:使用未染色的細胞做PMT的電壓設置;不要使用未染色的補償微球設置電壓

   

CytoFLEX 支持在線及脫機調補償。多色應用中,增加新的單染管到先前保存的補償實驗中,輕松實現全新補償矩陣的建立。并支持增益設置改變后,補償值自動進行修改,因此無需手動調整補償。

在線根據增益轉換補償矩陣



QQ截圖20201026114754.png

從補償庫導入補償值-工作流程:

640 (6).png

從補償文件導入補償值:

從補充文件導入補償值.gif


檢測線性與補償

CytoFLEX平臺實測熒光強度與對應檢測器增益設定值呈線性關系。調整增益時,軟件自動實時重新計算溢出值。半導體工藝可高度重現,因此CytoFLEX平臺的實測熒光強度與對應檢測器的增益設置成線性關系。而基于PMT檢測的非線性意味著需要根據經驗來確定電壓。


QQ截圖20201029120020.png



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