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外囊泡的來源廣泛，細菌外囊泡（BEV）同樣也會影響各種細胞行為，包括遺傳信息的傳輸、噬菌體感染、代謝介導以及細菌-細菌和細菌-宿主之間的相互作用。為了方便大家更全面的認識BEV在生物治療開發中的研究現狀，我們希望通過這篇綜述來系統地向大家進行介紹。

PART/01  作為基因治療的遞送載體

A. 靶向骨的BEVs-hCXCR4-SOST iRNA（BEV-CSs）治療骨質疏松癥的示意圖。

B. siRNA@M-/PTX-CA-OMV調節巨噬細胞代謝和抑制腫瘤轉移的示意圖。

C. OMVtRNA - pre-miR-126 對抗乳腺癌的示意圖。

D.BEV遞送的DNA質粒作為疫苗的示意圖。

E. BEV遞送了CRISPR-Cas 9，用于樹突狀細胞靶向基因編輯。

PART/ 02  用于遞送治療性分子

A. OMV@PGZ 搭載在中性粒細胞的便車上進入大腦后，用于增強缺血性中風治療效果的示意圖。

B. BEV 遞送化療藥物阿霉素用于癌癥治療的示意圖。

C. BEV負載左氧氟沙星對抗抗生素耐藥細菌的示意圖。

D. 加載利福平的介孔二氧化硅顆粒，被革蘭氏陰性大腸桿菌的BEV包被，以克服革蘭氏陰性菌原本的耐藥性。

E. BEV 遞送的過氧化氫酶緩解腫瘤缺氧并增強放療效果的示意圖。

PART/ 03  用于遞送聯合治療的功能性制劑

A. 融合黑色素瘤細胞膜囊泡（CMV）和沙門氏菌衍生的外膜囊泡（OMV）的外囊泡封裝 PLGA - 吲哚菁綠（PI@EPV）以增強協同抗腫瘤作用的示意圖。

B. OMV 包被的聚多巴胺納米顆粒（MOD@DMV）增強抗瘤光熱免疫治療的構建路線方案。

C. MOD@DMV形態的TEM圖像和光熱性能的表征。

D.靶向仿生遞送平臺（ZnBq/Ce6@ZIF-8@OMV）的圖示，大腸桿菌的 OMV在基因改造后，靶向對鮑曼不動桿菌的特異性識別，用于運輸金屬抗生素對抗多重耐藥細菌。

E. ZnBq / Ce6@ZIF-8@OMV在體內發揮抗菌作用，消除腦組織中的細菌并促進感染小鼠的存活。

F. 生物礦化大腸桿菌衍生的外膜囊泡，以減輕過度反應的炎癥反應和肝損傷，包裹溶瘤腺病毒以介導腫瘤細胞自噬，用于系統免疫治療。

PART/ 04 作為納米疫苗

01/ 抗細菌感染疫苗

A. 含有 SaoA-LPP的BEV納米疫苗可保護小鼠免受豬鏈球菌感染。 

B. 富含T3SS-3和T6SS-1（M9-OMV）的基于BEV的疫苗可保護小鼠免受毒性性類鼻疽芽孢桿菌的侵害，且對活細胞沒有毒性。

C. ΔompAΔompCΔompD BEV納米廣譜疫苗保護小鼠免受所有沙門氏菌菌株和APEC O78的侵害。

D. 雜交納米疫苗（Ab-NP）表現出高度的尺寸均勻性和更強的免疫反應。

E. BEV與肺泡巨噬細胞膜雜交以提高生物相容性和調節免疫反應，降低免疫過度刺激、過度炎癥或對宿主組織造成損傷。

02/ 抗病毒感染疫苗

A. 將外露SARS-CoV-2刺突蛋白的細胞膜囊泡與鼠傷寒沙門氏菌的BEV雜交，形成病毒模擬雜交膜衍生囊泡（HMV），BEV作為佐劑來增強免疫反應。 

B. 在BEV上改進LPS可保護小鼠免受不同血清型的流感病毒感染。 

C. 將HIV-1包膜近端外部區域（MPER）與外膜蛋白OmpF摻入BEV納米疫苗上可誘導抗HIV 1-抗體的產生。

D. 基于BEV的疫苗誘導針對 8 種血清型HPV的L2特異性IgG滴度。

E. 負載HPV E7的BEV疫苗表現出抗腫瘤功效，表明該疫苗對HPV陽性或宮頸癌患者具有潛在的治療價值。 

F. 表達融合HCV蛋白的BEV納米疫苗在小鼠中誘導IgG-1，表明BEV具有卓越佐劑特性及其作為未來HCV疫苗開發平臺的潛力。

03/ 抗腫瘤疫苗

A. 基于OMV的疫苗示意圖: 通過在ClyA上融合多種蛋白質捕獲器 （Spycatcher 和 Snoopcatcher）進行多功能抗原展示，實驗表明其在 MC38腫瘤模型中具有潛在的抗腫瘤免疫力。

B. 基于OMV的mRNA遞送系統方案：通過在OMV表面融合RNA結合蛋白 L7Ae和內體逃逸促進蛋白LLO 。

C. 基于OMV的mRNA遞送系統的轉移抑制效果，對體內的抗腫瘤療效和長期免疫記憶的影響。

D. 通過膜融合嗜粘蛋白阿克曼菌的外膜囊泡和腫瘤衍生外泌體制備 Lipo@HEV的示意圖，輔以表達PD-L1的質粒，用于協同癌癥免疫治療。

E.制備和生物礦化OMV疫苗（OMV-SIRPα@CaP/GM-CSF）以增強血液中的安全循環，刺激訓練免疫力以進行不同的腫瘤消退。

BEV的優勢

1.與哺乳動物細胞來源的細胞外囊泡（MEV）相比，BEV具有一些顯著的特點：

更易生產、產量更高，且成本更低。作為細菌的衍生物，其倍增時間短，可以進行高密度的液體培養，只需依賴于廉價且容易獲得的液體培養基，從而降低了成本益。

2. 高度穩定，并且對蛋白酶和核酸酶等多種酶活性具有抵抗力這一特性，適合用于對溫度和酶活性敏感的生物分子貨物，同時允許在高溫下長期儲存生物分子。而無需長時間昂貴的物流過程（如冷凍儲存）。

3. 穿透能力更強，能夠穿透生物組織屏障，如上皮細胞層，靶向骨骼結構，甚至繞過血腦屏障（BBB），同時BEVs具有MEV不具備的對親本細菌的親和力。

貝克曼庫爾特生命科學細菌外囊泡純化方案

參考文獻：

1. Bacteria extracellular vesicle as nanopharmaceuticals for versatile biomedical potential2.Bacterial extracellular vesicles as bioactive nanocarriers for drug delivery: Advances and perspectives