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猴痘病毒與超離純化

猴痘病毒與超離純化
貝克曼庫爾特生命科學  2024-08-30  |  閱讀:539

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鑒于剛果民主共和國和越來越多的非洲國家出現猴痘病例激增現狀。世界衛生組織8月14日宣布,猴痘疫情構成“國際關注的突發公共衛生事件”(上一次是新冠)。


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猴痘的主要傳播途徑和癥狀1


從2022年起,在我國多個省份也先后報告多例猴痘病例。2023年7月26日,國家衛健委發布《猴痘防控方案》。讓我們一起來解讀一下該方案中一些我們關心的重點問題:


Q 什么是猴痘病毒?

A 與天花病毒同屬正痘病毒屬。1958年在猴子中發現該病毒。1970年首例確診人類病例。


Q 猴痘的傳染源是什么?

A 目前認為非洲嚙齒類動物可能為其自然宿主。傳染源包括猴痘病例及感染的嚙齒類動物、猴和猿等靈長類動物。


Q 猴痘病毒傳播途徑?

A 主要通過直接接觸病變皮膚或黏膜傳播,亦可通過被病毒污染的物品和飛沫傳播,接觸感染動物的呼吸道分泌物、病變滲出物、血液及其它體液,或被感染動物咬傷、抓傷感染傳播。


Q 臨床癥狀有哪些?

A 通常包括皮疹和黏膜疹,常見癥狀包括發熱、頭痛、背痛、肌痛、淋巴結腫大等。


Q 病程及嚴重程度?

A 猴痘為自限性疾病,一般病程約2—4周,大多數病例癥狀會自行消失,重癥和死亡主要為兒童、孕婦和免疫力低下人群,死率約為0.1%。


實驗室如何分離猴痘病毒?

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猴痘病毒電鏡圖片


早在2022年9月報告了首例從中國大陸輸入的猴痘(MPX)病例時。中國疾病預防控制中心就成功使用超速離心分離和富集了培養后的猴痘病毒2


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密度梯度離心精純猴痘病毒顆粒示意圖


如果只是簡單的富集病毒,那么常規的超速差速離心沉淀就可以2。如果要獲得高質量的病毒樣品進行后續研究,那么可以考慮加一步蔗糖密度梯度離心3,4。這里推薦水平轉子(例如SW 41、SW 32)來進行離心,保證獲得更好的病毒條帶。


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離心過程中的潛在安全風險


由于猴痘等病毒的純化往往具有極大的生物安全隱患。因此需要對于離心過程進行嚴格控制。Beckman Optima系列超速離心機提供從主機——轉子——耗材全流程的離心生物安全解決方案。


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耗材

一次性快封管,通過無線熱封器可以達到完全密封,避免樣品漏出。


轉子

轉子蓋在真空中形成密封,防止泄漏,可以不開蓋的情況下,整體的移動轉子,在安全處再打開,轉子也可整體滅菌處理。


主機

兩組HEPA過濾器分別置于空氣流入口和流出口,高效去除氣溶膠中的病毒顆粒,超速離心時防止氣溶膠外溢。


參考文獻:1. Monkeypox virus (MPXV): A Brief account of global spread, epidemiology, virology, clinical features, pathogenesis, and therapeutic interventions. 20232. Isolation and Characterization of Monkeypox Virus from the First Case of Monkeypox — Chongqing Municipality, China, 2022 3. Retrospective Analysis of Monkeypox Infection.4. Comparative Proteomics of Human Monkeypox and Vaccinia Intracellular Mature and Extracellular Enveloped Virions

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